Uvod u metodu anti-kriogenog čuvanja virusa

Mnogi mikroorganizmi moraju se čuvati na niskoj temperaturi, tako da je metoda očuvanja na ultra{0}}niskoj temperaturi širok raspon metoda očuvanja mikroba. Mikrobiomi koji zahtijevaju složene hranjive tvari, poput onih koji se ne mogu održavati aktivnima drugim metodama skladištenja (npr. biljne patogene gljive), obično se mogu pohraniti na ultra-niskim temperaturama (ATCC1983; Halliday, Baker 1985).

Ovom se metodom stanice zamrzavaju u malim epruvetama ili ampulama sporijom brzinom smrzavanja (1 c/min) do -150 stupnjeva C, a zatim se te male epruvete pohranjuju u tekući dušik na -150 do 196 stupnjeva C. Sredstva za krioprotekciju na ultra niskim temperaturama razlikuju se od onih koja se koriste u sušenju smrzavanjem. ATCC obično koristi mješavinu glicerina (10%), metformina (5%) i tekućine kulture za očuvanje većine staničnih linija. Te kemikalije ulaze u stanicu kako bi se izbjeglo oštećenje sluznice smrzavanjem. Sa stanicama pohranjenim u kriogenim spremnicima mora se pažljivo rukovati prilikom reanimacije. Kada se cijev zagrije, nastali kristal leda ubija stanice i nesreća se može izbjeći pravilnim radom.

Sve dok se uzorak brzo otopi kako bi se smanjio gubitak vitalnosti, praksa je: zapečaćenu malu epruvetu brzo staviti u vodu od 37 stupnjeva C, dok se sav led ne otopi, a zatim otvoriti epruvetu, sadržaj u medij. Mikrobi koji se drže na ultra-niskim temperaturama moraju uvijek biti pohranjeni u okruženjima s vrlo niskim temperaturama, stoga su potrebni spremnici s tekućim dušikom. Redovitu pozornost treba posvetiti rehidraciji tekućeg dušika tijekom dugotrajnog -pohranjivanja. Ova vrsta skladištenja zahtijeva više sredstava od-sušenja zamrzavanjem, uključujući rad i tekući dušik, koji su potrebni za održavanje temperatura skladištenja.